液相色谱仪伴随分析测定的需求功能不断提升,与经典液相色谱柱装置相比拥有了更智慧化的操作系统,稳定性能提升,灵敏度、可靠性能加强,用于食品检测、化工分析、环境监测、药物分析等多领域。
一、液相色谱仪运行原理简述
可将“液”“固”两种状态下的液体混合物进行先分离后鉴定的仪器。
注:此先分离后鉴定的方法适用于“液-液色谱(LLC)”及“液-固色谱(LSC)”两种状态混合物。
液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。另外,科捷仪器液相色谱仪配套产品有六通进样阀、自动进样器、超声波清洗器、色谱柱温箱、在线脱气机、溶剂过滤器、真空泵、液相色谱柱等。
二、液相色谱仪操作五步骤
1、准备
1.1.准备所需流动相,用合适的0.45滤膜过滤,超声脱气20min。
1.2.根据待测样品的需要更换合适的色谱柱(注意方向)和定量环。
1.3.配制样品的标准溶液,用合适的0.45um滤膜过滤
1.4.检查仪器各部件是否连接正常,其中包括电源线、数据线、地线以及输液管道
2、开机
2.1.接通电源,一次打开检测器、输液泵,待检测器自检结束,显示测量状态时再打开电脑、打印机及电脑显示器等。
2.2.更换流动相并排气泡。
2.3.将管路的不锈钢过滤头放入装有准备好的流动相储液瓶中
2.4.逆时针转动泵的排空阀,约半圈,之后拧松排空阀
2.5.按输送泵(purge)键,绿灯亮时开始以5.0ml/min流速冲洗约2分钟,管路无气泡时按下(stop)键,重新设定流速值。
3、设计参数
3.1.流速设定
3.2.波长设定
3.3.设定完成按运行(run)按键
3.4.色谱工作站操作:依次执行→打开“在线工作站”→“通道1”→“OK”→“数据采集”后进行零点校正、查看基线,确定基线稳定后关闭查看基线可以进样。
进样后进行采集、预览、查看结果、打印
4、进样
4.1.进样前将(A/Z)检测器按键调零查看基数是否在0mv,有偏差则(零点校正)按键进行调试
4.2.用样品清洗注射器、排除气泡、抽取适量后将手动进样阀杆调到(Load)位置,样品注入进样阀后调到(Inject)位置,以此进样操作步骤完成,进入在线工作站自动采集数据流程。
5、系统清洗
由于分析样品时流动相系统中含有缓冲盐类物质,需使用10%甲醇水溶液,以1.0ml/min冲洗40分钟后更换甲醇试剂,以同样1.0ml/min冲洗40分钟,(stop)按键停泵,关机。
三、液相色谱仪工作原理
首先,流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内。由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统。液相色谱仪也常以吸附柱色谱法、分配柱色谱法、离子交换柱色谱法、凝胶柱色谱法,四类根据工作原理命名的色谱法来区分。