一、流动相方面:
1、高效液相色谱仪
(1)液体流动相可为离子型、极性、弱极性、非极性溶液。
(2)液体流动相不仅起运载样品的作用,同时对样品组份有一定的亲和力(排阻色谱除外)它会与固定相展开对组份的剧烈竞争,可与被分析样品产生相互作用,并能改善分离的选择性。因而对分离起很大的作用。
(3)液体流动相动力粘度为10-3Pa·s,输送流动相压力高达2〜20MPa。
2、气相色谱仪
(1)气体流动相为惰性气体,不与被分析的样品发生相互作用,它仅起运载样品的作用,
一般对分离结果好坏没有影响。
(2)气体流动相动力粘度为10-5Pa·s,输送流动相压力仅为0.1〜0.5MPa
二、固定相方面:
1、高效液相色谱仪
(1)分离机理:可依据吸附、分配、筛析、离子交换、亲和等多种原理进行样品的分离,
可供选用的固定相种类繁多。
(2)色谱柱:固定相粒度小为5〜10um;填充柱内径3〜6mm;柱效为103 〜 104 ,柱温为常温。
2、气相色谱仪
(1)分离机理:依据吸附、分配两种原理进行样品分离,可供选用的固定相种类较多。
(2)色谱柱:固定相粒度大0.1〜0.5mm;柱内径为1〜4mm,柱长1〜4m,柱效为102 〜 103毛细管柱内径为0.1〜0.3mm,柱长10〜100m,柱效为103 〜 104 ;柱温为常温〜300℃。
三、检测器方面:
1、高效液相色谱仪
(1)选择性检测器:紫外可见检测器、二极管阵列检测器、荧光检测器、电化学检测器激光诱导荧光检测器。
(2)通用型检测器:蒸发激光散射检测器、折光示差检测器
2、气相色谱仪
(1)选择性检测器:电子捕获检测器、氮磷检测器、火焰光度检测器
(2)通用型检测器:热导检测器、火焰离子化检测器
四、仪器的组成方面
1、高效液相色谱仪
溶质在液相中的扩散系数(10-5cm2/s)很小,因此在色谱柱以外的死空间应尽量小,以
减少柱外效应对分离效果的影响。
2、气相色谱仪
溶质在气相中的扩散系数(10-1cm2/s)大,在使用填充色谱柱时,柱外效应的影响较小,但是对于毛细管色谱柱也要尽量减少柱外效应对分离效果的影响。
五、操作条件方面
1、柱温:高效液相色谱仪一般在室温下操作,而气相色谱仪须根据样品设置色谱柱温度。
2、高效液相色谱仪流动相的流速比气相色谱仪流动相的流速慢1个数量级以上。
3、液体的粘度比气体大100倍,密度大1000倍,所以高效液相色谱仪有很高的柱前压力。
4、气体可以压缩,气相色谱仪用压缩后的气体的受控的释放作为流动相的动力;但是液体不能压缩,所以高效液相色谱仪只能用高压输液泵作为流动相的动力。
5、高效液相色谱仪的样品回收比较容易,且可规模制备;气相色谱仪的样品大部分会被破坏。
6、决定气相色谱仪分离好坏的主要操作条件是固定相、流动相流速和柱温; 决定高效液相色谱仪分离好坏的主要操作条件是固定相、流动相流速和流动 相的组成。
7、在对付复杂样品方面,气相色谱仪可采用柱温程序升温办法进行组份的分离;高效液相色谱仪则采用梯度洗脱的办法。